复旦大学附属肿瘤医院采购人***内需求论证

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项目名称：采购人基因ORF表达文库项目

预算：60万

预期用途：蛋白表达，基因功能分析

一、具体需求清单：

二. 主要技术指标

1. 插入片段

1.1 为指定人源基因名，具体基因名清单见附录1；

1.2所含ORF至少覆盖附录1表格中指定基因名清单中95%的基因，即不少于5660个；

1.3 需要保证不低于85%的质粒序列与提供的序列或者官网序列保持一致；

1.4不少于60%的ORF序列与NCBI 2022年10月版本的CCDS库中的序列或者与NCBI 2022年12月的参考转录组中的序列具有100%氨基酸匹配；

1.5每一条ORF序列都连接到同一种载体骨架中。

2. 载体骨架

2.1 为pCMV6-Entry真核表达载体，可转化后获得稳定表达细胞株；

2.2 载体具备对全库序列进行更换载体的特性，如稀有酶切、连接等；

2.3 载体带有Myc-DDK标签，标签融合于ORF的C端；

2.4 载体带有CMV强真核启动子和Kozak2.5 载体带有真核细胞筛选抗性基因: Neromycin。

2.6载体具体统一的酶切位点：SgfI-MluI 

3. 交货形式

3.1 实物以冻干粉形式交货；

3.2 保存在96孔透明细胞培养板中，并用可撕、耐低温防漏液的封膜封闭；

3.3 每个克隆的提供量不少于10ug；

3.4 除实物外需提供对应数据清单，随货数据清单为电子表格或电子表格附带其他电子文档。

三. 发货及运输

1. 合同签订后12个月内提供完全；

2. 随货数据清单可通过电子邮件或存储介质提供，需在对应的实物到货前一周内发送给甲方单位；数据清单每一条数据包含但不限于以下内容：gene symbol，NCBI accession NO或者BC NO，板编号***style="19px">ORF 完整序列，tag信息，质粒骨架名称，大肠杆菌抗性信息等。

四. 提供的电子报告和验收标准

1. 产品出厂前需要由厂家负责以下检验：至少对10%的板子进行抽查检验，此类板每板抽查不少于5个孔检验，验证方法为对质粒2端进行Sanger测序确认。

2. 到货后3个月内，由甲方单位***200个克隆进行复苏活率验证，复苏活率不少于90%；

3. 到货后3个月内，由甲方单位***50个可复苏克隆进行测序验证，不少于85%的插入片段的氨基酸序列与提供的数据清单里的序列100%匹配。

4. 主要技术指标完全满足所述要求。

五. 维保

1. 维保从到货日期开始起计算，不少于12个月；

2. 如在维保期内发现有复苏生长失败的克隆，或者测序后氨基酸序列与数据提供的氨基酸序列有不匹配的克隆，可免费更换一次，若更换后序列仍与数据提供序列不匹配的按合同平均单价***款用于其它产品或服务的支付，同时该克隆不再重复提供；

附录1基因名清单.xlsx

       如有意者请于2023.09.14.17:00之前与后勤服务科取得联系 联系人：***。联系电话：***242